近日,Horticultural Plant Journal在线发表了ylzzcom永利总站线路检测侯喜林团队题为“发根农杆菌介导的快速、简单、高效的不结球白菜转基因根系转化方法”的研究论文。
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不结球白菜(Non-heading Chinese cabbage,NHCC),Brassica campestris的变种之一,是中国长江流域的重要蔬菜作物。然而,稳定转化系统的尚未建立和遗传转化效率低下等因素限制了不结球白菜的基因功能研究。发根农杆菌介导的(Agrobacterium rhizogenes-mediated,ARM)转基因技术是一种快速有效的转化方法,但在不结球白菜品种中尚未建立相关转化体系。
针对不结球白菜植株特点,对传统的发根农杆菌介导的遗传转化方法进行了优化,优化后的方法(两步法和一步法)更适用于非无菌环境中的不结球白菜活体植株。
(1)建立了适用于不结球白菜活体植株的两步转化法(图1),通过表型检测、荧光观察和PCR分析,鉴定了两步法诱导后复合植株中的转基因根系(图2)。同时,两步法侵染后,5日龄(下胚轴较为纤细)不结球品种(SZQ、HMG、WYM、CX)的转化效率43.33%-51.09%,30日龄(下胚轴较为粗壮)的不结球白菜CX品种转化效率可达到54.88%。
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(2)建立了适用于不结球白菜活体植株的一步转化法(图3),同时,一步法对于5日龄(下胚轴较为纤细)不结球品种(SZQ、HMG、WYM、CX)的转化效率均在 60% 以上,普遍高于两步法。
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本研究建立了发根农杆菌介导的不结球白菜转基因根系获得体系,优化后的方法(两步法和一步法)可以简便、快速、有效地建立具有转基因根系的复合不结球白菜植株,为基因功能研究和不结球白菜的遗传改良提供基础。